りゅうしざんけんたいをもちいたいでんしけんさに

流死産検体を用いた遺伝子検査2

自然流産（自然流産の既往歴を有するもの）又は死産

• （1）対象

• ・今回妊娠で臨床的に流産と診断された患者。子宮内に流産胎児・絨毛が残存している場合、または、体外に排出されたが流産胎児・絨毛を回収できた場合。
• ・今回妊娠で臨床的に死産と診断された患者。子宮内に流死胎児、絨毛が残存している場合、または、体外に排出されたが死産胎児・絨毛を回収できた場合。

• （2）胎児（胎芽）・絨毛の採取
  採取方法は下記の（a）または（b）の手順にて行う。
• （a）流死産物が体内に存在する場合
  体内にある流死産物（胎児（胎芽）・絨毛）を子宮内容除去術（流産手術）、分娩誘発術または帝王切開術により採取し、絨毛組織または胎児組織・胎児成分のみを分離する。
• （b）流死産物が体外に排出された場合
  体外へ排出された流死産物（胎児（胎芽）・絨毛）の組織から、絨毛組織・胎児成分のみを分離する。
  分離した絨毛・胎児組織の一部を解析施設に移送し、次世代シークエンサーにて解析する。
• （3）検査・解析
  分離した絨毛・胎児組織の一部を解析施設である衛生検査所に移送し、拡散抽出を行う。抽出核酸から必要に応じて全ゲノム増幅、DNAライブラリ調整の調整後、次世代シークエンサーを用いて塩基配列を決定する。試薬は当該NGSに対応するThermoFisherScientific社製のReproSeqを使用する。得られた塩基配列データを用いて染色体数的異常・検出可能な構造異常の判定を行う。NGSを用いた多くの検査実績のある株式会社OVUSが、独自に構築した「OVUS POC解析システム」でデータ解析を行う。なお、分離した絨毛・胎児組織の一部をG分染法で検査し結果を比較する。

―判定結果に応じた追加について―
次世代シークエンサーを用いた解析では、倍数性の有無を検出できないため、性染色体がXXかつ染色体異常が認められない場合には、精製されたDNAを用いて、各染色体上の複数のSTRマーカーについてPCR増幅し、断片長解析によって倍数性の有無も判定する。